对于无菌室一般有如下的要求

　　无菌操作间的洁净度应达到10000级，室内温度保持在20℃-24℃，湿度保在45%~60%，超净台洁净度应达到100级。无菌室应每月检查菌落数，在无菌室或超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的平板计数琼脂培养基的 15mL，放至凝固后，倒置于36℃ ±1℃培养箱培养 48h，证明无菌后，取平板 3～5个，分别放置在工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于36℃ ±1℃培养箱培养 48h，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级的洁净室平均不得超过3个菌落，如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。

　　无菌室应保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、打火机、镊子、接种环、剪刀及玻璃笔等。严禁堆放杂物，以防污染。无菌室应备有工作浓度的消毒液 ，如 5%的甲酚溶液，75%的酒精，0.1%的新洁尔灭溶液等等。需要带入无菌室使用的仪器、药品、玻璃器皿等一切物品，均应包扎严密或应经适宜的方法灭菌。如培养皿、吸管用不锈钢简装好在160℃-170℃的干燥箱中灭菌 1h~2h;生理盐水用高压灭菌器于121℃灭菌20分钟等。无菌室使用前必须打开无菌室和缓冲间的紫外灯辐照30分钟以上，并且同时打开净化风机进行换气。 在紫外灯关闭后半小时方可进入无菌室进行工作。在样品检验完毕后，应及时清理剩余样品和各种药品及玻璃器皿，安全退出后再打开所有紫外灯辐照灭菌30分钟。

　　无菌室一般是在微生物实验室内专辟的一个小房间，面积不宜过大，约4m2~5m2，高2.5m左右即可。无菌室外要设一个缓冲间、净化风淋间及更衣间。无菌室和缓冲间都必须密闭。室内装备必须有空气过滤装置。无菌室和缓冲间都装有紫外线灯，无菌室的紫外线灯距离工作台面lm。无菌室内的地面、墙壁必须平整，不易藏污垢，便于清洁。工作台的台面必须处于水平状态。工作人员进入无菌室应在更衣室穿戴好灭菌的衣、帽、鞋，经过净化风淋室，再到缓冲间，然后进入无菌室进行检验工作。